All-in-One? validated qPCR primers
All-in-One? miRNA qRT-PCR 系列試劑盒包括All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 2.0(miRNA檢測(cè)試劑盒)、All-in-One? miRNA First-Strand cDNA Synthesis Kit 2.0(miRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒)和All-in-One? miRNA qPCR Kit(miRNA定量試劑盒)。本系列產(chǎn)品與All-in-One? Validated miRNA Primers 或者 miProfile? miRNA qPCR Arrays配套使用,可用于miRNA表達(dá)量的高效檢測(cè)。
由Poly A聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶,以及專為All-in-One?試劑特別研發(fā)的PAP/RT反應(yīng)緩沖液組成的一種新穎的、優(yōu)化的反轉(zhuǎn)錄混合試劑,使以上兩種用于成熟miRNA逆轉(zhuǎn)錄(cDNA合成)反應(yīng)的酶獲得最佳活性。
All-in-One? qRT-PCR Detection Kit 2.0包括RT(逆轉(zhuǎn)錄)和qPCR(定量檢測(cè))兩部分試劑,利用基于SYBR? Green的qPCR技術(shù),可對(duì)低至20 pg的Total RNA(或者低至10 pg的small RNA)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確定量。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
All-in-One? miRNA系列試劑靈敏度高、特異性強(qiáng)、性價(jià)比高
可對(duì)檢測(cè)低至20 pg的Total RNA(或者低至10 pg的small RNA)
可與miProfile? miRNA表達(dá)量定量檢測(cè)陣列或All-in-one?特異miRNA驗(yàn)證引物配套使用
All-in-One? miRNA檢測(cè)試驗(yàn)快速、簡(jiǎn)便
圖1. All-in-One? miRNA qRT-PCR Detection Kit 2.0的實(shí)驗(yàn)流程。在3’poly A加尾反應(yīng)后,M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和一種獨(dú)特的Oligo dT Adaptor primer從3’端開(kāi)始進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄;以All-in-One? miRNA qPCR primer和Universal Adaptor PCR Primer作為上下游引物,試劑盒中包含SYBR? Green I的qPCR Mix對(duì)經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄的miRNA進(jìn)行特異檢測(cè)。
以上檢測(cè)試劑產(chǎn)品與GeneCopoeia提供的下列miRNA質(zhì)粒構(gòu)建和實(shí)驗(yàn)相結(jié)合,可廣泛用于miRNA功能分析研究。
驗(yàn)證引物
每條All-in-One? miRNA 特異驗(yàn)證引物均使用專利算法設(shè)計(jì)并經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)確證。
在miRNA定量PCR試驗(yàn)中,該系列驗(yàn)證引物與基于SYBR? Green I 的All-in-One? miRNA qRT-PCR Kit配套使用,性能可靠,重復(fù)性好。
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qPCR array
miProfile? miRNA PCR Array為檢測(cè)不同組織或細(xì)胞中特定miRNA的表達(dá)量而設(shè)計(jì),這些miRNA按照目錄產(chǎn)品或定制要求成套設(shè)置。
每塊96孔板包含84對(duì)PCR引物(正向引物:miRNA特異引物;反向引物:通用引物)。miRNA特異引物都經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,融解曲線均呈單一銳鋒,電泳條帶均呈單一條帶,且與擴(kuò)增產(chǎn)物相符。
使用普通的實(shí)時(shí)定量PCR反應(yīng)條件,即可簡(jiǎn)便進(jìn)行高通量的miRNA表達(dá)量檢測(cè)和分析。
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