SARS-CoV-2 S蛋白假慢病毒
Lentifect? SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒
復(fù)能基因的Lentifect? SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒由特定優(yōu)化的包裝體系制備而成。以SARS-CoV-2 Spike糖蛋白替代慢病毒包裝體系中的囊泡性口炎病毒G糖蛋白(VSV-G)為衣殼蛋白進(jìn)行包裝制備成“假病毒”,該病毒可有效感染含ACE2(SARS-CoV-2的人類受體)的細(xì)胞。(Ou, X., et al., 2020. Nature Communications doi: 10.1038/s41467-020-15562-9; Hoffman, M., et al., 2020. Cell doi: 10.1016/j.cell.2020.02.052)。
Lentifect? SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒應(yīng)用:
預(yù)防SARS-CoV-2病毒感染的疫苗研制
抗SARS-CoV-2病毒中和抗體的作用和機(jī)制研究
開發(fā)抗病毒治療藥物
研究病毒-受體相互作用的機(jī)制
Lentifect? SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒優(yōu)勢(shì):
以新冠病毒S蛋白作為表面衣殼糖蛋白
S蛋白多樣性,全長(zhǎng)、截短、點(diǎn)突變可供選擇
提供eGFP和luc蛋白標(biāo)記,同時(shí)滿足不同研究需求
不具備致病性,安全可靠,只需P2實(shí)驗(yàn)室環(huán)境
注意:SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒僅用于研究目的。它不用于人類的診斷或治療。
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性能數(shù)據(jù)
復(fù)能基因的研發(fā)團(tuán)隊(duì)測(cè)試了SARS-CoV-2 S 蛋白假慢病毒感染ACE2表達(dá)細(xì)胞的能力,如下圖1所示。
A.
B.
C.
圖1. 用表達(dá)eGFP/hLuc的SARS-CoV-2 S假慢病毒(假病毒)轉(zhuǎn)導(dǎo)表達(dá)ACE2-或ACE2/TMPRSS2的HEK293T細(xì)胞。用10 μl假病毒在96孔板中轉(zhuǎn)導(dǎo)每個(gè)細(xì)胞系。轉(zhuǎn)導(dǎo)72小時(shí)后,在熒光顯微鏡下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行拍照,隨后測(cè)量熒光素酶活性或進(jìn)行FACS分選。SL221:表達(dá)ACE2的HEK293T細(xì)胞。SL222:表達(dá)ACE2和TMPRSS2的HEK293T細(xì)胞。SP101:全長(zhǎng)S蛋白,D614變體。SP103:全長(zhǎng)S蛋白,D614G變體。SP001:截短S蛋白,D614變體。SP003:截短S蛋白,D614G變體。A. 熒光顯微鏡。B. 熒光素酶活性測(cè)定。使用GeneCopoeia的Luc-Pair? Firefly Luciferase HS Assay Kit(貨號(hào)LF007),從假病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞培養(yǎng)物中提取20 μl細(xì)胞裂解液,分析螢火蟲熒光素酶活性,用FACS分選法測(cè)定轉(zhuǎn)導(dǎo)的單位滴度units/ml。