OmicsLink? shRNA表達(dá)克隆
復(fù)能基因提供病毒和非病毒載體的人、小鼠和大鼠全基因組OmicsLink? shRNA表達(dá)克隆,shRNA序列經(jīng)專利算法設(shè)計包括莖(19-29對核苷酸)和環(huán),確保高效的抑制作用和最低的脫靶效應(yīng)。
shRNA抑制效率保證:對于構(gòu)建到慢病毒和哺乳動物載體的shRNA克隆,我們針對每個基因提供3個克隆,在靶細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率達(dá)到85%以上的情況下,保證至少有1個克隆通過qRT-PCR檢測對靶基因的表達(dá)抑制水平達(dá)到70%以上。
靶向任意細(xì)胞:使用慢病毒和非病毒載體系統(tǒng),既可以轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)導(dǎo)shRNA進(jìn)入常規(guī)的分裂細(xì)胞,也可以進(jìn)入難轉(zhuǎn)染的非分裂細(xì)胞,如原代細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞等。
靈活的載體選擇:每個shRNA克隆提供5 μg純化質(zhì)粒,也提供客戶定制的慢病毒載體的shRNA克隆。定制該克隆,請?zhí)顚懕砀瘛?/p>
標(biāo)簽及報告基因:載體中帶有的mCherry和eGFP報告基因可以用于監(jiān)測轉(zhuǎn)染和轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,嘌呤霉素標(biāo)記可用于穩(wěn)定細(xì)胞系的篩選。
全長測序的表達(dá)框架:載體的插入序列已經(jīng)過測序,包括啟動子、編碼shRNA的正義和反義鏈、發(fā)夾結(jié)構(gòu)、終止子和其他接頭序列。
圖1. shRNA克隆的病毒和非病毒表達(dá)載體
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