BlazeTaq? One-Step SYBR Green RT-qPCR
BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit
BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit是基于SYBR Green 染料法的Real Time One-Step RT-PCR反應(yīng)試劑。試劑盒以RNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)和定量檢測可在同一反應(yīng)管內(nèi)完成,簡化操作的同時可有效降低污染的風(fēng)險。試劑盒包含了性能優(yōu)異的逆轉(zhuǎn)錄酶,以及含有熱啟動Taq DNA聚合酶、dNTP和必需的緩沖液成分混合而成的5×預(yù)混液。
BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit使用BlazeTaq RTase Mix將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,并使用抗體修飾的Taq DNA聚合酶進行Real Time PCR反應(yīng),抗體的完全封閉有效避免了聚合酶在熱循環(huán)反應(yīng)前被激活。另外,經(jīng)優(yōu)化的Buffer體系大大提高了PCR反應(yīng)的擴增效率和特異性,且檢測靈敏度可達0.1 pg總RNA,適用于各類型RNA模板的檢測。
經(jīng)測試表明,BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit與各種常用Real Time PCR儀器兼容,并在RNA檢測的靈敏度和特異性方面優(yōu)于競爭對手的產(chǎn)品。
產(chǎn)品優(yōu)勢
靈敏度高:可從低至1 pg的RNA提取物中精確檢測目標(biāo)RNA。
特異性強:有效抑制引物二聚體及非特異性擴增的產(chǎn)生。
擴增效率高:在寬廣的GC含量范圍內(nèi)能維持高擴增效率。
圖1. 使用BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit,對HeLa細胞RNA提取物中GAPDH和Actin水平進行分析,RNA提取物以10倍梯度稀釋成7個樣本,總量的范圍為100 ng至0.1 pg,并設(shè)無模板對照(NTC組)。 A.GAPDH的擴增曲線(紅色); B.Actin的擴增曲線(藍色); C.GAPDH(紅色)和Actin(藍色)擴增片段的熔解曲線。
圖2. BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit(紅色)與Competitor T試劑盒(藍色)產(chǎn)品的性能比較。對HeLa細胞RNA提取物中GAPDH和Actin水平進行分析,RNA提取物以10倍梯度稀釋成7個樣本,總量的范圍為100 ng至0.1 pg。 A.HeLa細胞提取物中GAPDH擴增曲線的比較; B.HeLa細胞提取物中Actin擴增曲線的比較。
圖3. BlazeTaq? One-Step SYBR? Green RT-qPCR kit(紅色)與Competitor P試劑盒(藍色)產(chǎn)品的性能比較。對HeLa細胞RNA提取物中GAPDH水平進行分析,RNA提取物以10倍梯度稀釋成7個樣本,總量的范圍為100 ng至0.1 pg。 A.HeLa細胞提取物中GAPDH擴增曲線的比較; B.HeLa細胞提取物中GAPDH擴增片段的熔解曲線對比。峰圖顯示Competitor P試劑盒出現(xiàn)了非特異性擴增。
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