Cas9蛋白
復(fù)能基因提供大腸桿菌表達(dá)的Streptococcus pyogenes(釀膿鏈球菌)Cas9蛋白。Cas9蛋白具有核定位序列(NLS),兩種類型可選,不帶標(biāo)簽/C-端帶6×His標(biāo)簽。
產(chǎn)品優(yōu)勢
與CRISPR質(zhì)粒系統(tǒng)相比具有相當(dāng)或者更高的編輯效率
直接運送Cas9核糖核蛋白(Cas9和sgRNA的復(fù)合物,RNP)到細(xì)胞內(nèi)提高了精度控制
RNP可以通過使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染或電轉(zhuǎn)的方法有效地運送
GeneHero? Cas9蛋白(GE001/GE003)與競爭公司的切割活性比較(胞外)
圖1. 使用HUWE DNA片段作為切割模板。針對HUWE基因設(shè)計3個sgRNA,分別與Cas9蛋白孵育后進行下一步切割實驗。紅點標(biāo)注為切割后的DNA條帶,Ct為未切割的HUWE DNA片段。
圖2. 使用HUWE DNA片段作為切割模板。sgRNA與Cas9蛋白孵育后進行切割實驗。GeneHero? Cas9蛋白(3-5列)與IDT Alt-R? Cas9蛋白(6-7列)分別進行250ng,100ng和50ng稀釋反應(yīng)。紅箭頭標(biāo)注為切割后的DNA條帶,1列反應(yīng)中只有Cas9,2列反應(yīng)中只有sgRNA。
GeneHero? Cas9蛋白在HEK293中進行基因編輯(胞內(nèi))
圖3. GeneHero? Cas9蛋白在HEK293中進行基因編輯。針對HUWE基因設(shè)計3個sgRNA,分別與Cas9蛋白共轉(zhuǎn)到HEK293細(xì)胞中。從細(xì)胞基因組中擴增HUWE片段,然后進行T7EI驗證。紅箭頭標(biāo)注為切割后的DNA條帶。
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