GeneHero? sgRNA 文庫(kù)
復(fù)能基因?yàn)槟峁?CRISPR sgRNA 文庫(kù),用于高通量敲除特定或者客戶指定的人類基因族基因或通路基因。通過(guò)基因敲除實(shí)現(xiàn)的功能缺失型篩選是哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)基因分析、促進(jìn)基因研究、基因組級(jí)別功能調(diào)查(如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路)以及藥物研究(如靶標(biāo)甄別和藥物機(jī)制研究)的強(qiáng)大工具。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
每個(gè) sgRNA 文庫(kù)克隆都是單獨(dú)構(gòu)建,經(jīng)過(guò)測(cè)序驗(yàn)證后再混合,以保證文庫(kù)的質(zhì)量及對(duì)目的基因家族的 sgRNA 表現(xiàn)度。
可提供預(yù)制或定制 sgRNA 文庫(kù)。
每個(gè)目的基因設(shè)計(jì)2條或更多 sgRNA。sgRNA克隆
多種產(chǎn)品規(guī)格可供選擇,如慢病毒顆?;旌衔膸?kù)、轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒DNA混合文庫(kù)或菌種混合文庫(kù)。
GeneHero? 人類 sgRNA 文庫(kù)使用慢病毒載體,可通過(guò)兩種不同方法(直接轉(zhuǎn)染或包慢病毒顆粒后轉(zhuǎn)導(dǎo))實(shí)現(xiàn)大規(guī)模功能篩選。對(duì)于每個(gè)目的基因,我們會(huì)至少設(shè)計(jì)2個(gè)sgRNA 分別靶向基因的不同序列區(qū)(極少數(shù)基因由于序列限制只能設(shè)置1條 sgRNA)。這些 sgRNA 序列都經(jīng)過(guò)設(shè)計(jì)優(yōu)化及測(cè)序驗(yàn)證,確保高效的基因敲除。您可以選擇訂購(gòu)分別針對(duì)不同基因家族的標(biāo)準(zhǔn)混合文庫(kù),或根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)需要定制屬于您的文庫(kù)組合。文庫(kù)目前提供慢病毒顆粒、轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒 DNA 以及菌種等三種形式。它們能轉(zhuǎn)染或轉(zhuǎn)導(dǎo)多種細(xì)胞系,包括 Cas9 核酸酶穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞系。
圖 1. 使用 sgRNA 文庫(kù)進(jìn)行大規(guī)模篩選的示意圖
產(chǎn)品應(yīng)用
使用大量 sgRNA 分別或混合進(jìn)行高通量基因敲除篩選
藥物靶標(biāo)研究(圖2)
表型篩選
綜合致死性篩選
圖 2. GeneHero? sgRNA 文庫(kù)應(yīng)用流程。 A:混合文庫(kù)篩選。對(duì)感染了sgRNA混合文庫(kù)的細(xì)胞株進(jìn)行篩選,獲取具備目的表型的陽(yáng)性細(xì)胞株進(jìn)行Sanger測(cè)序識(shí)別對(duì)應(yīng)的sgRNA,或通過(guò)深度測(cè)序搜索比例過(guò)高或過(guò)低的sgRNA。B:使用 sgRNAs 文庫(kù)array(獨(dú)立克隆文庫(kù))進(jìn)行基因敲除篩選。各板孔里的細(xì)胞株分別感染不同的sgRNA慢病毒顆粒,并篩選具備目的表型的陽(yáng)性細(xì)胞株。如此無(wú)需測(cè)序即可獲知與目的表型相關(guān)的sgRNA。
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